期刊简介
《传染病信息》（Infectious Disease Information）是解放军第三○二医院主办的国内外公开发行的传染病专业学术性杂志。为全军传染病学专业委员会会刊、中国科技核心期刊、解放军优秀医学期刊。本刊：办刊宗旨为努力报道传染病信息，为提高传染病防治水平服务；以述评与论著报道为主，重点报道传染病临床与基础研究；紧跟专业研究热点，报道迅速及时，热情地服务于传染病及相关专业的医、教、研、预、管、人员与医学生。 主编：陈菊梅 张玲霞
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- 杂志名称：传染病信息杂志
- 主管单位：中国人民解放军总后勤部政治部宣传部
- 主办单位：解放军第三0二医院
- 国际刊号：1007-8134
- 国内刊号：11-3886/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：2001入选中国期刊方阵期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏
H5N1禽流感病毒抗原基因的体外转录及RNA标准品构建
张锦海；王忠灿；郑纪山；吕恒；鲁娟东；顾海涛；王平；王长军
关键词：H5N1亚禽流感病毒, 克隆, 体外转录
摘要：目的 通过基因克隆和体外转录,获得H5N1禽流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白M(M)基因的RNA片段,为病原学检测提供阳性定量标准品.方法 设计H5N1禽流感病毒的HA、NA及M基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H5N1禽流感病毒总RNA,用RT-PCR获得相应片段,分别连接至Pgem-T easy质粒,转化宿主菌XL10-Gold,然后提取阳性克隆的重组质粒DNA,测序鉴定后用限制性核酸内切酶Nde I酶切线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,产物用Dnase酶处理、纯化后测定浓度,用实时荧光定量PCR构建标准曲线进行验证.结果 获得含H5N1禽流感病毒HA、NA、M基因全长开放阅读框序列的准确定量拷贝数的RNA片段,质量浓度分别为503.9、379.2、437.8ng/μl.结论 获得的RNA片段可作为H5N1禽流感病毒核酸快速检测方法的阳性定量标准品.
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